大鼠肝癌細胞(RH-35)介紹:大鼠肝癌細胞(RH-35)源自由N-2feuorenyldiuctamid 在雄性AxC 大鼠中誘導的可移植
1) 來源:大鼠,肝癌
2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25 瓶或者1mL 凍存管包裝
運輸和保存:使用含有優(yōu)質胎牛血清的2ml 凍存管發(fā)送存活細胞。收到細胞后,
大鼠肝癌細胞(RH-35)用途:僅供科研使用。
大鼠肝癌細胞(RH-35)培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備DMEM-H 培養(yǎng)基(DMEM-H,GIBCO,貨號12800017,添加NaHCO3 1.5g/L),
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37 攝氏度,培養(yǎng)箱
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL 細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS 潤洗細胞1-2 次。
2. 加2ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM 條件下離心4 分
4. 將細胞懸液按1:2 到1:5 的比例分到新的含8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄
注意事項:
1. 收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。