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人膽囊上皮細胞永生化細胞
人膽囊上皮細胞永生化細胞
規(guī)格:
貨期:
編號:MZ-3689
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規(guī)格:
T25瓶
凍存管

產品名稱 人膽囊上皮細胞永生化細胞
商品貨號 MZ-3689
中文名稱 人膽囊上皮細胞永生化細胞
細胞數(shù)量 1*10^6
組織來源 人膽囊組織。
細胞形態(tài) 上皮樣,多角形細胞,貼壁培養(yǎng)。
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
培養(yǎng)基 原代上皮細胞培養(yǎng)體系
細胞描述 膽囊,是位于右方肋骨下肝臟后方的梨形囊袋構造,有濃縮和儲存膽汁之作用。膽囊壁由粘膜、肌層和外膜三層組成。 膽囊內面以粘膜覆蓋,有發(fā)達的皺襞。膽囊收縮排空時,皺襞高大而分支;膽囊充盈時,皺襞減少變矮。粘膜上皮為單層柱狀,內分散分部著少量杯狀細胞。膽囊粘膜細胞具有典型的吸收型細胞的特征,具有較強的吸收和濃縮功能,上皮細胞吸收膽汁中的水和無機鹽,經(jīng)細胞側面的質膜轉運至上皮細胞間隙內,吸收的水和無機鹽通過基膜進入固有層的血管和淋巴管內。同時,膽囊粘膜亦有分泌功能,分泌粘液。 該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶SV40基因。
培養(yǎng)條件 Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃
細胞凍存 Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%(for reference)Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞運輸 干冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸(T25細胞瓶)
姓名 手機號(微信同號) QQ
梅經(jīng)理 17280875617 1438578920
胡經(jīng)理 13345964880 2438244627
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